人工合成寡核苷酸探针可以利用酶、荧光染料进行标记;人工合成寡核苷酸探针一次合成可得到大量产品,成本较低。
人工合成寡核苷酸探针,是以核苷酸为原料,利用DNA合成仪,人工合成的生物探针,属于核酸探针的一种。从细胞中提取出来的DNA片段,存在高度重复的序列,人工合成寡核苷酸探针根据目的基因设计,避免了这一缺点。
根据新思界产业研究中心发布的《2024-2029年中国人工合成寡核苷酸探针行业市场深度调研及发展前景预测报告》显示,人工合成寡核苷酸探针的制作,需要知道目的基因序列,根据目的基因进行设计,合成的探针序列较短,为十几个到几十个核酸片段,与目的基因互补,无需再纯化,复杂度低,且杂交条件与细胞提取DNA探针相同,通常为单链探针,具有组织穿透性好、稳定性好、特异性高、杂交速度快等特点。
人工合成寡核苷酸探针经过示踪物标记,与样品中核酸分子进行杂交,当样品中存在与其互补的核酸序列,二者相连形成双链,之后未杂交探针被洗去,通过探针标记物的自显影、发光效果,对人工合成寡核苷酸探针进行检测,进而测定样品中是否含有与人工合成寡核苷酸探针互补的核酸序列。
人工合成寡核苷酸探针可以识别目的基因序列中一个碱基的变化,即通过杂交来识别单个碱基突变、单个碱基错配情况;人工合成寡核苷酸探针可以利用酶、荧光染料进行标记;人工合成寡核苷酸探针一次合成可得到大量产品,成本较低。
但人工合成寡核苷酸探针的长度必须适中,太长或者太短都会导致杂交过程出现问题;且由于人工合成寡核苷酸探针片段较短,携带的标记物较少,又采用的是非放射性同位素标记,敏感度有限;此外人工合成寡核苷酸探针与mRNA杂交形成的双链,稳定性低于cRNA探针与mRNA形成的双链。
核酸探针细分产品主要包括DNA探针、cDNA探针、cRNA探针、人工合成寡核苷酸探针四种,前三种均为克隆产品,而后一种为人工合成产品,更易于大批量生产,因此在生命科学实验、生物医药原料药制备等领域应用广泛。此外,人工合成寡核苷酸探针还可以应用到基因诊断、个体化用药分析等方面。
新思界行业分析人士表示,DNA合成仪是自动化合成结构类似DNA或RNA的寡核苷酸的仪器,是人工合成寡核苷酸探针行业的核心上游设备,其设计、研发、生产技术壁垒高。近年来,受生物学、医学、药学等行业快速发展,我国市场对DNA合成仪需求快速增长。目前,我国已经具备DNA合成仪生产能力,但产品品质与进口产品相比存在较大差距,对我国人工合成寡核苷酸探针行业发展造成一定不利影响。
原文标题 : 【聚焦】人工合成寡核苷酸探针特点突出 在生命科学领域应用广泛