01
文章背景简介
BACKGROUND INTRODUCTION
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国目前常见的原发性肝癌之一,且具有高发病率和高死亡率的特点。根据2020年的肝癌统计报告显示，亚洲的肝癌病例数占全球病例数的72.5%。从流行病学角度分析，老年人、男性和亚洲人群是HCC风险最高的人群,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是HCC的主要危险因素。尽管如今有很多方式可以用来治疗HCC，如手术、放疗、化疗、靶向药物治疗等，但仍有约70%的复发率。此外，HCC隐匿性强，在早期无特异性症状，大多数患者首次确诊时已发展到中晚期，手术等传统治疗方法的疗效已有局限， 这也是HCC死亡率高的原因之一。
多糖是一类复杂的碳水化合物聚合物，广泛存在于植物、微生物、真菌、藻类和动物中。它们由超过十个单体糖分子组成，具有较大的分子量，通常在数万以上。多种多糖具有药用价值，如桑黄多糖能够抑制TMK-1细胞增殖，并促进细胞凋亡；枸杞多糖可以抑制MGC-803和SGC-7901细胞的生长，使细胞周期分别阻滞于G0/G1期和S期； 紫菜多糖对SGC-7901细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用；五味子多糖通过抑制ERK活化，并通过线粒体依赖途径诱导对肾癌细胞（RCC)的抑制作用。
射干（Belamcanda chinensis (L.) DC）是一种传统中药材，属于鸢尾科，其干燥根茎在中国被广泛用作清热、解毒、化痰、利喉以及活血化瘀和散结的药物。现代医学研究显示，射干中含有的化学成分，如黄酮类化合物（如虎杖甙和蹄纹天竺素）、挥发油、酚酸、甾体和三萜等，具有抗肿瘤活性，如从射干中分离出黄酮类化合物tectorigenin和tectoridin，具有明确的抗肿瘤活性；射干的水提物可以抑制小鼠肿瘤的增长，但其具体成分和作用机制尚不完全清楚。此外，射干中也含有多糖成分，若具有抗肿瘤活性，可能具有开发为新型抗肿瘤药物的潜力。
为了分离和获得射干多糖，并探索它们作为抗肿瘤剂的潜力及潜在作用机制，南开大学药学院Yinan Zhao等人开展了相关研究，并于2024年5月在《Carbohydrate Polymers》杂志（IF=10.7；化学1区）发表了题为“An arabinose-rich heteropolysaccharide isolated from Belamcanda chinensis (L.) DC treats liver cancer by targeting FAK and activating CD40”的文章。
02
所用到的主要方法
METHODS
（1）热水提取和乙醇沉淀
（2）DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析
（3）Sephadex G-75柱层析
（4）HPGPC-MALS（高效液相色谱-多角度光散射）。
（5）GC-MS（气相色谱-质谱联用）
（6）NMR（核磁共振）
（7）FT-IR（傅里叶变换红外光谱）
（8）Congo红实验：这是一种用于检测多糖三螺旋结构的实验方法。Congo红与三螺旋结构的多糖形成特定的复合物，通过测量吸收峰的变化来判断多糖是否具有三螺旋结构。
（9）流式细胞术（Flow cytometry）
（10）细胞活力实验（CCK-8实验）
（11）免疫印迹（Western blot）
（12）伤口愈合实验（Wound healing assay）
03
文章主要内容摘要
ABSTRACT
本研究从射干（Belamcanda chinensis (L.) DC）中分离出的一种富含阿拉伯糖的杂多糖BCP80-2，并探讨了其对肝癌的治疗作用及作用机制。研究发现，BCP80-2能够显著抑制斑马鱼模型中的肿瘤生长、转移和血管生成。此外，BCP80-2通过抑制FAK信号通路来抑制HepG2细胞的迁移，并且能够激活免疫调节作用，上调共刺激分子CD40、CD86、CD80和MHC-II的分泌。总之，射干多糖BCP80-2可以通过靶向FAK信号通路和激活CD40诱导的适应性免疫来抑制肿瘤发展。
简而言之，本研究的主要内容有：
1.BCP80-2的纯化和单糖组成分析：从射干中分离出BCP802多糖及纯化过程，并通过HPGPC色谱、UV光谱和单糖标准比较分析其单糖组成的结果。
2.BCP80-2的绝对分子量分析：利用HPGPC-MALS-RI技术确定了BCP80–2的精确分子质量参数，包括Mw、Mz和Mn。
3.BCP80-2的结构分析：通过甲基化和GC-MS检测，以及NMR光谱分析，揭示了BCP80–2的糖基结构和连接方式。
4.BCP80-2的构象分析：使用Congo红实验和ν值计算，分析了BCP80–2在NaCl溶液中的构象，确定其为灵活的随机线圈结构。
5.BCP80-2的抗肿瘤活性：通过斑马鱼模型评估了BCP80–2对肿瘤生长以及对血管生成的抑制作用。还研究了BCP80-2在体外对肿瘤细胞增殖和迁移的影响，以及其通过抑制FAK信号通路来抑制肿瘤细胞迁移的机制。
6.BCP80-2对RAW264.7和DC2.4细胞的免疫调节活性作用分析。
原文标题 : 富含阿拉伯糖的射干异多糖通过靶向FAK并激活CD40治疗肝癌
